Der vierte Film der Immenhof-Kassenerfolge unter der Regie von Wolfgang Schleif. Alexander (Horst Janson) führt mit seinen Töchtern Billy und Bobby als Pächter des Immenhofs ein glückliches Leben. Dann aber erhält er die Nachricht, dass die Hofbesitzerin die Pacht erhöhen will. Wenig später besucht Dalli (Heidi Brühl) das Gut ihrer Jugend. Zunächst scheint es zwischen ihr und Alexander gewaltig zu funken. Doch dann erfährt Alexander, dass Dalli die Besitzerin des Immenhofs ist. Viele Jahre sind vergangen, seit die Zwillinge Dick und Dalli den Immenhof verlassen haben. Heute lebt Alexander Arkens mit seiner Mutter und seinen Zwillingstöchtern Billy und Bobby auf dem Gut, das von ihm als landwirtschaftlicher Betrieb genutzt wird. Unterstützung erhält der Witwer dabei von dem Pferdeknecht Ole. Der Student Klaus ist auf dem Hof, um an den Pferden Verhaltensforschung zu betreiben. Vor allem Billy und Bobby können sich gar nicht vorstellen, je wieder an einem anderen Ort zu leben. Dann aber erhält Alexander einen Brief der Liegenschaftsverwaltung, der ihn darüber informiert, dass seine Pacht stark erhöht werden soll. Doch so viel Geld hat er nicht. Den Rat seiner Mutter, der ihm unbekannten Besitzerin des Hofes, Brigitte Voss, einen klärenden Brief zu schreiben, lehnt der stolze Alexander ab. Unterdessen spürt Brigitte, die man früher nur "Dalli" nannte, dass ihr Beruf als Konferenzdolmetscherin zunehmend an ihren Nerven zerrt. Sie beschließt, den Immenhof zu besuchen, um am Ort ihrer Jugend zur Ruhe zu kommen. Unterwegs lernt sie Alexander kennen. Zwischen beiden funkt es auf Anhieb. Als Alexander erfährt, dass Dalli bzw. Brigitte seine Vermieterin ist, wendet er sich von ihr ab. Die drei Mitte der 1950er-Jahre entstandenen "Immenhof"-Filme - "Die Mädels vom Immenhof" (1955), "Hochzeit auf Immenhof" (1956) und "Ferien auf Immenhof" (1957) - zählen zu den großen Kassenerfolgen des deutschen Nachkriegskinos. Mit "Die Zwillinge vom Immenhof" inszenierte Wolfgang Schleif, der Regisseur des ersten "Immenhof"-Films, 18 Jahre später eine Fortsetzung der Heimatfilmserie. Dabei gelang es ihm auf amüsante Weise, die Abenteuer der Immenhof-Bewohner mit neuen Protagonisten fortzuführen. Einzig Heidi Brühl war von der ursprünglichen Besetzung noch übrig. Neu hinzu kamen Horst Janson, Bernd Herzsprung und Olga Tschechowa. 1974 inszenierte Schleif mit "Frühling auf Immenhof" einen letzten Kinofilm über den Gutshof in Schleswig-Holstein und seine Bewohner.